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沃特世HPLC液相色谱投入使用前的准备工作,你了解多少?

更新时间:2021-03-26      点击次数:1317
   沃特世HPLC液相色谱是一种以液体做流动相的用于物质分离和检测的常用仪器。主要由进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统等组成。在工作时,HPLC依靠泵加压样品,令其通过填充有吸附剂的压力柱,依据溶质在不用溶剂中的溶解度不同而对物质进行分离的,检测器在定性物质的同时,可定量测定各个成分的比例。
  沃特世HPLC液相色谱使用前期准备工作:
  1.始终保持仪器包括内在系统的清洁。
  2.室内温度始终保持恒定,因为室温的变化对高效液相色谱检测器有影响。
  3.所有溶液、试剂、样品、标准溶液、注射剂等都应事先准备好。
  4.提前准备好备用电源防止停电。
  沃特世HPLC液相色谱操作流程:
  1.将已经过滤并脱气的流动相注入储液罐;
  2.用流动相冲洗金属过滤器,然后将过滤器浸入储液罐的流动相中;
  3.将储液罐放置在一定的高度,以避免由于搬运和其他操作人员的移动而造成不必要的跌落。
  4.然后按以下顺序依次启动高效液相色谱仪:泵→检测器→高效液相色谱软件→按预先计划的方法设置软件参数,如分析时间、检测波长、流速等。
  5.启动泵,运行5分钟,主要是为了排除系统中的气泡,结束后关闭所有排气阀;
  6.然后按照预先计划的速度,以固定的速率,如1mL/min左右,运行流动相,走基线,直到基线平稳,就可以在计算机软件上进行监视;
  7.基线平稳后,在软件中设置样品的运行参数,如流速和分析时间等。分析时间会因样品、流速、柱长等因素变化。
  8.参数设置完毕后,将固定体积的样品溶液注入进样阀,然后在软件中启动注入命令,进样器中的样品溶液就随流动相进入色谱柱;
  9.通过软件监视各项读数,当检测器检测到样品所有峰值,停止运行并设置新的进样。在下一个样品分析前,建议留出5-10分钟,待流动相通过色谱柱,以便清洗之前样品的残留物;确认基线稳定后,进行下一次注射。
  10.分析结束后,先关闭检测器,然后关闭泵,后关闭软件。
  沃特世HPLC液相色谱广泛应用在有机化工、生物医学、食品科学、环境监测等领域。
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