液质联用仪是一种结合液相色谱（LC）和质谱（MS）技术的分析设备，主要用于复杂样品的分离与检测。其工作原理是通过液相色谱系统分离样品组分，再由质谱系统进行高灵敏度分析。液相色谱部分负责样品分离，常用超高效液相色谱提升效率；质谱系统则包括离子源（如ESI、APCI）、质量分析器（如三重四极杆、Orbitrap）和检测器。
该仪器具有高分辨率、多模式分析能力，支持痕量物质检测，灵敏度可达痕量级（pg水平）。其优势在于高灵敏度、强抗干扰能力和高通量分析，能够动态同步监测多组分。液质联用仪在药物研发、环境检测、食品安全、临床药理学研究、天然药物开发、残留分析、毒物分析以及蛋白与肽类鉴定等领域应用广泛。例如，在药物代谢研究中，它能精确监测药物体内过程；在环境分析中，可检测水样中痕量污染物。
一、开机前准备
环境检查
确保实验室温度（通常18~25℃）、湿度（40%~60%）和电源符合仪器要求。
检查氮气、氩气等气体供应压力（如氮气发生器、氩气钢瓶），确保压力稳定（如小表<0.1MPa）。
仪器状态确认
检查液相色谱系统（泵、自动进样器、柱温箱）和质谱系统（离子源、检测器）是否正常，无漏液或污染。
清洁喷雾电极、色谱柱等关键部件，避免交叉污染。
二、开机与系统初始化
开启设备顺序
打开氮气发生器、氩气钢瓶→启动计算机→打开UPLC自动进样器电源→打开UPLC泵电源→最后打开质谱仪电源。
等待质谱仪预热（约5分钟），直至离子源透视镜亮起。
软件启动与真空检查
启动控制软件（如Masslynx），进入诊断模式（Diagnostics），检查真空系统状态。
碰撞室真空度需在4小时内达到理想值（如80%以上），否则需延长抽真空时间。
三、方法建立与参数设置
色谱条件设置
流动相配置：选择合适溶剂（如水、甲醇、乙腈），使用0.45μm过滤器过滤并脱气（超声或在线脱气）。
色谱柱安装：根据样品特性选择C18、HILIC等色谱柱，设定流速（如0.2~1mL/min）、柱温（30~40℃）及梯度洗脱程序。
质谱条件优化
离子源选择：根据样品极性选择电喷雾电离（ESI）或大气压化学电离（APCI）源，调整源温度、电压等参数。
校准与调谐：使用标准品（如多肽混合物）进行质谱校准，确保质量精度（如偏差<0.1Da）。
扫描模式：根据需求选择全扫描（Full Scan）、选择性离子监测（SIM）或多反应监测（MRM）模式。
四、样品处理与进样
样品前处理
固体样品需提取、浓缩，液体样品需过滤（如0.22μm滤膜）或稀释，确保与流动相兼容。
避免引入颗粒物或杂质，防止堵塞色谱柱或污染离子源。
进样操作
使用自动进样器或手动注射，确保进样量准确（如1~100μL）。
编制样品表（Sequence），设置空白、标准曲线样品及待测样品的进样顺序。
五、数据采集与监控
启动运行
开始色谱分离与质谱检测，实时监控色谱图和质谱图，检查峰形、信号强度及噪音水平。
若出现异常（如峰分裂、信号漂移），需暂停运行并检查流动相、离子源或柱状态。
数据存储
保存原始数据文件（如.RAW或.MS格式），确保实验可追溯性。
六、数据分析与报告
色谱数据处理
根据保留时间、峰面积或峰高定量目标化合物，使用内标法或外标法绘制标准曲线。
质谱数据解析
通过分子离子峰（[M]+或[M]-）和碎片离子峰进行定性分析，结合数据库（如NIST、HMDB）或文献比对。
计算质量准确度（如误差<5ppm）以验证结果可靠性。
报告生成
整理样品信息、实验条件、定量结果及误差分析，生成PDF或Word报告并存档。
七、关机与维护
清洗系统
运行冲洗程序（如甲醇-水混合液），清洗色谱柱和流路，防止盐或残留物沉淀。
每周至少更换一次废液瓶，清洁喷雾电极和离子源。
关机顺序
先关闭质谱仪电源，再关闭UPLC泵和自动进样器，最后关闭计算机和气体供应。
若长期停机（超过一周），需保持质谱真空状态，避免微生物污染。
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