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FLD荧光检测器常见故障与解决办法

更新时间：2026-08-28      点击次数：73

故障1：基线噪声大 / 漂移

可能原因
检查方法
解决办法
PMT增益过高
检查PMT增益/高压设置
降低PMT增益；在灵敏度和噪声之间取平衡
流通池气泡
观察基线是否有尖刺
脱气流动相；冲洗排气
氙灯老化/不稳定
检查灯能量；记录使用时间
更换氙灯（寿命约1000~2000h）
流通池污染
目视检查；空白基线偏离
清洗流通池（水→甲醇→异丙醇）
环境光漏入
检查流通池室盖是否关闭
确保流通池室密封；检查遮光盖
流动相荧光杂质
换高纯溶剂对比
使用HPLC级溶剂；流动相过滤脱气

故障2：灵敏度下降

可能原因
检查方法
解决办法
氙灯能量衰减
检查灯能量值
更换氙灯
Ex/Em波长偏移
用标准荧光物质校验
执行波长校准
流通池窗口污染
目视检查4个石英窗
清洗石英窗（FLD有4面窗口）
光路未对准
运输或移动后出现
光路校准；联系厂家
PMT老化
增益逐年增大才能维持相同灵敏度
更换PMT
Ex/Em选择不当
重新扫描光谱确认
优化Ex/Em波长对

故障3：Raman散射干扰

可能原因
检查方法
解决办法
Em波长靠近Raman线
Raman散射在λex+3400cm⁻¹处；如Ex280nm→Raman约307nm
Em波长避开Raman线（通常Em-Ex>30nm）；减小狭缝带宽
流动相Raman散射
换不同溶剂后基线变化
选择合适溶剂；增大Em带宽分离Raman线

故障4：荧光猝灭

可能原因
检查方法
解决办法
溶解氧猝灭
脱气后灵敏度对比
充分脱气流动相；氦气鼓泡除氧
重金属离子猝灭
检查样品中是否含重金属
去除重金属；加掩蔽剂
浓度猝灭(内滤效应)
高浓度时峰面积不成比例
稀释样品至线性范围内
温度变化
荧光强度随温度升高而降低
控温；保持柱温箱温度稳定

故障5：流通池故障

可能原因
检查方法
解决办法
流通池堵塞
背压升高或无液流出
反冲洗；5%硝酸浸泡→水冲洗
石英窗破裂
目视检查
更换流通池
漏液
检查接头和密封件
更换密封件；拧紧接头
光窗指纹污染
拆下在光线下检查
戴手套操作；无尘纸蘸甲醇轻擦

故障6：波长校准偏移

可能原因
检查方法
解决办法
光栅位置偏移
用标准荧光物质(如硫酸奎宁)验证
执行波长校准程序
运输/震动
搬运后出现
搬运后重新校准
温度变化
室温大幅变化后出现
稳定室温；定期校准

日常维护要点

维护项目
频率
操作方法
氙灯预热
每次使用前
预热≥30min；氙灯需充分预热才能稳定
更换氙灯
每1000~2000h
更换后执行波长校准；记录使用时间
流通池清洗
每天使用后
水→甲醇冲洗各10min；FLD有4面石英窗更需注意清洁
深度清洗
每月
5%硝酸浸泡→水冲洗→甲醇冲洗
波长校准
每3~6个月
用硫酸奎宁(Ex350/Em450)或水Raman线校验
PMT增益检查
每6个月
用标准溶液检查PMT增益是否需增大才能达到同等响应
流动相脱气
每次使用
溶解氧会猝灭荧光！确保充分脱气
长期停机
>1周
甲醇冲洗；关电源；PMT避光存放；流通池保持干燥


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